Sökning: id:"swepub:oai:DiVA.org:su-24888" >
Tuning Escherichia ...
Tuning Escherichia coli for membrane protein overexpression
-
- Wagner, Samuel (författare)
- Stockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik
-
- Klepsch, Mirjam M. (författare)
- Stockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik
-
- Schlegel, Susan (författare)
- Stockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik
-
visa fler...
-
- Appel, Ansgar (författare)
- Stockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik
-
- Draheim, Roger (författare)
- Stockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik
-
- Tarry, Michael (författare)
- Stockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik
-
- Högbom, Martin (författare)
- Stockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik
-
van Wijk, Klaas J. (författare)
-
Slotboom, Dirk J. (författare)
-
- Persson, Jan O. (författare)
- Stockholms universitet,Matematiska institutionen
-
- de Gier, Jan-Willem (författare)
- Stockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik
-
visa färre...
-
(creator_code:org_t)
- 2008-09-23
- 2008
- Engelska.
-
Ingår i: Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - : Proceedings of the National Academy of Sciences. - 0027-8424 .- 1091-6490. ; 105:38, s. 14371-17376
- Relaterad länk:
-
https://www.pnas.org...
-
visa fler...
-
https://urn.kb.se/re...
-
https://doi.org/10.1...
-
visa färre...
Abstract
Ämnesord
Stäng
- A simple generic method for optimizing membrane protein overexpression in Escherichia coli is still lacking. We have studied the physiological response of the widely used “Walker strains” C41(DE3) and C43(DE3), which are derived from BL21(DE3), to membrane protein overexpression. For unknown reasons, overexpression of many membrane proteins in these strains is hardly toxic, often resulting in high overexpression yields. By using a combination of physiological, proteomic, and genetic techniques we have shown that mutations in the lacUV5 promoter governing expression of T7 RNA polymerase are key to the improved membrane protein overexpression characteristics of the Walker strains. Based on this observation, we have engineered a derivative strain of E. coli BL21(DE3), termed Lemo21(DE3), in which the activity of the T7 RNA polymerase can be precisely controlled by its natural inhibitor T7 lysozyme (T7Lys). Lemo21(DE3) is tunable for membrane protein overexpression and conveniently allows optimizing overexpression of any given membrane protein by using only a single strain rather than a multitude of different strains. The generality and simplicity of our approach make it ideal for high-throughput applications.
Ämnesord
- NATURVETENSKAP -- Kemi -- Organisk kemi (hsv//swe)
- NATURAL SCIENCES -- Chemical Sciences -- Organic Chemistry (hsv//eng)
Nyckelord
- engineering
- systems biotechnology
- proteomics
- Organic chemistry
- Organisk kemi
Publikations- och innehållstyp
- ref (ämneskategori)
- art (ämneskategori)
Hitta via bibliotek
Till lärosätets databas
- Av författaren/redakt...
-
Wagner, Samuel
-
Klepsch, Mirjam ...
-
Schlegel, Susan
-
Appel, Ansgar
-
Draheim, Roger
-
Tarry, Michael
-
visa fler...
-
Högbom, Martin
-
van Wijk, Klaas ...
-
Slotboom, Dirk J ...
-
Persson, Jan O.
-
de Gier, Jan-Wil ...
-
visa färre...
- Om ämnet
-
- NATURVETENSKAP
-
NATURVETENSKAP
-
och Kemi
-
och Organisk kemi
- Artiklar i publikationen
-
Proceedings of t ...
- Av lärosätet
-
Stockholms universitet