| 1. |
- Vilhelmsson Wesén, Emelie, 1989, et al.
(författare)
-
Role of Membrane Tension Sensitive Endocytosis and Rho GTPases in the Uptake of the Alzheimer's Disease Peptide Aβ(1-42)
- 2020
-
Ingår i: ACS Chemical Neuroscience. - : American Chemical Society (ACS). - 1948-7193. ; 11:13, s. 1925-1936
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- Intraneuronal accumulation of amyloid-β (Aβ) is an early pathological signum of Alzheimer's disease, and compartments of the endolysosomal system have been implicated in both seeding and cell-cell propagation of Aβ aggregation. We have studied how clathrin-independent mechanisms contribute to Aβ endocytosis, exploring pathways that are sensitive to changes in membrane tension and the regulation of Rho GTPases. Using live cell confocal microscopy and flow cytometry, we show the uptake of monomeric Aβ(1-42) into endocytic vesicles and vacuole-like dilations, following relaxation of osmotic pressure-induced cell membrane tension. This indicates Aβ(1-42) uptake via clathrin independent carriers (CLICs), although overexpression of the bar-domain protein GRAF1, a key regulator of CLICs, had no apparent effect. We furthermore report reduced Aβ(1-42) uptake following overexpression of constitutively active forms of the Rho GTPases Cdc42 and RhoA, whereas modulation of Rac1, which is linked to macropinosome formation, had no effect. Our results confirm that uptake of Aβ(1-42) is clathrin-and dynamin-independent and point to the involvement of a new and distinct clathrin-independent endocytic mechanism which is similar to uptake via CLICs or macropinocytosis but that also appear to involve yet uncharacterized molecular players.
|
|
| 2. |
- Bernerstedt, Thomas, et al.
(författare)
-
3500 kyrkor : Problem eller möjlighet. 8 Restuareringsexempel
- 2014
-
Rapport (populärvet., debatt m.m.)abstract
- I kyrkorna finner man de högsta kvaliteterna av arkitektur och konst som har stått i mänsklig makt att uppbringa. Kulturarvets värde är högt. Arkitektur är en konstart som förstärker funktionen/verksamheten – på samma sätt som t.ex. musik, poesi, skulptur eller måleri. Konstarterna går utöver funktionerna/verksamheterna, därför finns det alltid nya möjligheter att bearbeta. Restaureringskonstens uppgift är att tillvara arkitekturkvaliteterna, utveckla dem och förhöja dem. Det finns ungefär 3 500 kyrkor inom Svenska kyrkan, en tredjedel medeltida och entredjedel från 1950–60-talen. Sammantaget är det en komplex samling byggnader. Majoriteten av 6,4 miljoner medlemmar i Svenska kyrkan är intresserade av att kyrkobyggnaderna tas om hand. Färre säger sig vara intresserade av att aktivt delta i kyrkans kärnverksamhet. Men kyrkobyggnaden och verksamheten hänger samman; de enda byggnader som haft enoch samma användning i 1000 år är kyrkor. Att vårda och utveckla kyrkobyggnadsmiljöernaingår inte i kyrkans kärnverksamheter. Varför inte? Sedan relationsförändringen år 2000 då kyrkan skildes från staten har inga långsiktiga visioner eller strategier om förvaltningen av Sveriges mest tillgängliga kulturskatt framkommit. Inget drastiskt hände år 2000; antalet gudstjänstbesökare började minska långt tidigare. Varför ska vi vara så oroliga nu när vi inte var det förut? Våra kyrkor är i bättre skick än i något annat land i Europa, vi har aldrig haft det så bra som nu, ändå är det först nu som vi inte anser oss ha råd att sköta denna del av kulturarvet. Andra länder har en mängd olika sätt att finansiera och arbeta med kyrkobyggnader. Sverige har bara ett sätt, statsbidrag. En mängd oprövade möjligheter finns – ett gyllene ägg att förvalta! 20 studenter i Restaureringskonst har arbetat med kunskapsuppbyggnad i teori och praktik under året. Våra studier har innefattat tre innerstadskyrkor och fem andra kyrkor i Stockholms stift, praktiskt nåbara för våra studier. Vi är väl medvetna om de helt olikartade förutsättningar som finns i vårt avlånga land med Europas snabbaste urbaniseringstakt, även om vi haft ett begränsat antal fallstudier när vi tränat arbetsprocess och metodik. Året har förutom projektarbete omfattat föreläsningar, seminarier, workshops och studieresor inom restaureringshistoria, dokumentation med 3D-laserscanning, kulturhistoriskvärdering och analys, material och metoder för restaurering, gestaltning och bevarande,presentation och kommunikation. Av årets studenter är tio arkitekter, en ingenjör, sex antikvarier, två konservatorer och en förvaltare. Tack vare kursens blandade professioner är inledningdiskussionerna och det interna kunskapsutbytet en viktig del av utbildningen, liksom det nätverk som erbjuds genom inbjudna föreläsare och specialister inom praktisk restaurering och i forskningsfronten. Genom studiebesök och studieresor får studenterna kontakter ochintryck av hur restaurering tillämpas och diskuteras i olika sammanhang. I år har vi gjort studieresor till Tyskland och England samt inom Sverige. Kyrkan har i alla tider stått för högsta kvalitet i arkitektur och konst – årets kurs vill visa värdet av denna resurs och hur vi kan arbeta med uppgiften att upprätthålla och gärna öka kulturarvets kvaliteter genomrestaureringskonst.Vi tackar alla som bidragit till genomförandet av vår kurs i år; särskilt Stockholms stift och de församlingar som har gett oss tillgång till sina kyrkor.
|
|
| 3. |
- Daste, Frederic, et al.
(författare)
-
Control of actin polymerization via the coincidence of phosphoinositides and high membrane curvature
- 2017
-
Ingår i: Journal of Cell Biology. - : ROCKEFELLER UNIV PRESS. - 0021-9525 .- 1540-8140. ; 216:11, s. 3745-3765
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- The conditional use of actin during clathrin-mediated endocytosis in mammalian cells suggests that the cell controls whether and how actin is used. Using a combination of biochemical reconstitution and mammalian cell culture, we elucidate a mechanism by which the coincidence of PI(4,5)P-2 and PI(3)P in a curved vesicle triggers actin polymerization. At clathrin-coated pits, PI(3) P is produced by the INPP4A hydrolysis of PI(3,4)P-2, and this is necessary for actin-driven endocytosis. Both Cdc42.guanosine triphosphate and SNX9 activate N-WASP-WIP-and Arp2/3-mediated actin nucleation. Membrane curvature, PI(4,5)P-2, and PI(3) P signals are needed for SNX9 assembly via its PX-BAR domain, whereas signaling through Cdc42 is activated by PI(4,5)P-2 alone. INPP4A activity is stimulated by high membrane curvature and synergizes with SNX9 BAR domain binding in a process we call curvature cascade amplification. We show that the SNX9-driven actin comets that arise on human disease-associated oculocerebrorenal syndrome of Lowe (OCRL) deficiencies are reduced by inhibiting PI(3) P production, suggesting PI(3) P kinase inhibitors as a therapeutic strategy in Lowe syndrome.
|
|
| 4. |
|
|
| 5. |
- Hoernke, Maria, et al.
(författare)
-
EHD2 restrains dynamics of caveolae by an ATP-dependent, membrane-bound, open conformation
- 2017
-
Ingår i: Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - : Proceedings of the National Academy of Sciences. - 0027-8424 .- 1091-6490. ; 114:22
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- The EH-domain-containing protein 2 (EHD2) is a dynamin-related ATPase that confines caveolae to the cell surface by restricting the scission and subsequent endocytosis of these membrane pits. For this, EHD2 is thought to first bind to the membrane, then to oligomerize, and finally to detach, in a stringently regulated mechanistic cycle. It is still unclear how ATP is used in this process and whether membrane binding is coupled to conformational changes in the protein. Here, we show that the regulatory N-terminal residues and the EH domain keep the EHD2 dimer in an autoinhibited conformation in solution. By significantly advancing the use of infrared reflection-absorption spectroscopy, we demonstrate that EHD2 adopts an open conformation by tilting the helical domains upon membrane binding. We show that ATP binding enables partial insertion of EHD2 into the membrane, where G-domain-mediated oligomerization occurs. ATP hydrolysis is related to detachment of EHD2 from the membrane. Finally, we demonstrate that the regulation of EHD2 oligomerization in a membrane-bound state is crucial to restrict caveolae dynamics in cells.
|
|
| 6. |
|
|
| 7. |
|
|
| 8. |
- Holst, Mikkel Roland, et al.
(författare)
-
Clathrin-Independent Endocytosis Suppresses Cancer Cell Blebbing and Invasion
- 2017
-
Ingår i: Cell Reports. - : Cell Press. - 2211-1247. ; 20:8, s. 1893-1905
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- Cellular blebbing, caused by local alterations in cellsurface tension, has been shown to increase the invasiveness of cancer cells. However, the regulatory mechanisms balancing cell-surface dynamics and bleb formation remain elusive. Here, we show that an acute reduction in cell volume activates clathrinindependent endocytosis. Hence, a decrease in surface tension is buffered by the internalization of the plasma membrane (PM) lipid bilayer. Membrane invagination and endocytosis are driven by the tension- mediated recruitment of the membrane sculpting and GTPase-activating protein GRAF1 (GTPase regulator associated with focal adhesion kinase-1) to the PM. Disruption of this regulation by depleting cells of GRAF1 or mutating key phosphatidylinositol- interacting amino acids in the protein results in increased cellular blebbing and promotes the 3D motility of cancer cells. Our data support a role for clathrin-independent endocytic machinery in balancing membrane tension, which clarifies the previously reported role of GRAF1 as a tumor suppressor.
|
|
| 9. |
- Hubert, Madlen, et al.
(författare)
-
Caveolae biogenesis and lipid sorting at the plasma membrane
- 2022
-
Ingår i: Plasma membrane shaping. - : Academic Press. - 9780323899116 - 9780323899192 ; , s. 219-228
-
Bokkapitel (refereegranskat)abstract
- The plasma membrane of many cell types, in particular, endothelia, smooth muscle cells, and adipocytes, contains numerous small invaginations termed caveolae. In nonmuscle cells, caveolae are formed by lipid-driven assembly of the integral membrane protein caveolin 1 (Cav1) and the peripherally attached protein cavin1. Accessory proteins such as Eps15 homology domain-containing 2 (EHD2) control the cell surface association of caveolae, together providing a unique invaginated membrane structure with distinct dynamics and protein and lipid compositions. These features enable caveolae to survey the plasma membrane integrity and to adjust membrane tension, and sort lipids according to the cellular requirements. Currently, characteristics of the protein and lipid interface of caveola are being unraveled, and this chapter is focused on the present knowledge of caveolae biogenesis and dynamics and describes methods that are being used to study the role of caveolae in lipid flux and lipid composition at the cell surface.
|
|
| 10. |
|
|
