| 1. |
- Hansson, Ulla-Britt, et al.
(författare)
-
Antigen-binding sites dominate the surface properties of antibodies
- 1996
-
Ingår i: Immunotechnology. - 1380-2933. ; 2:4, s. 276-276
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- We have found a remarkable relationship between the specificity of antibodies and their chromatographic behavious upon liquid-liquid partition chromatography (LLPC). Well characterized human and murine monoclonal antibodies and Fab/Fv fragments thereof as well as mouse/human chimeric antibodies were employed. While, lgG 1, 2 and 4 antibodies with identical specificities (affinity constants) have identical partition properties, lgG antibodies with different partition properties reacted with different partition epitopes or had different affinities against the same epitope. Hence, the surface properties of the antigen binding sites dominate over all other surfaces of the free antibody molecule. LLPC may also be used to detect conformational changes occuring upon binding of antigen by antibody. Antigen-antibody complexes formed by different lgG antibodies against a large antigen like HSA all had similar surface properties. different from those of both antigen and antibody. In contrast, the surface properties of complexes formed by small antigens haptens are related to those of the lgG antibody. In addition, antigen-antibody complexes were found to have similar surface properties irrespective of the molar ratio of antigen to antibody at which the complexes had been formed.
|
|
| 2. |
- Hansson, Ulla-Britt, et al.
(författare)
-
Conformational isomerism of IgG antibodies
- 1997
-
Ingår i: BBA - Protein Structure and Molecular Enzymology. - 0167-4838. ; 1340:1, s. 53-62
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- The purpose of this study was to determine why apparently homogeneous IgG antibodies were, in some cases, fractionated into at least two components by liquid-liquid partition chromatography (LLPC) in an aqueous two-phase system. Four mouse monoclonal IgG antibodies, two against albumin, one against IgG and one against thyroxine, were shown to adopt different conformational isomeric forms. The four antibodies existed in an equilibrium between two or three conformational forms, the proportion of which could also be estimated by LLPC. Since LLPC detects mainly conformational differences within the antigen-binding sites of IgG antibodies, it could be concluded that the conformational forms differed with respect to their combining sites. Moreover, the isomeric forms of an antibody directed against a protein antigen, formed antigen-antibody complexes with almost identical surface properties. In contrast, complexes with different surface properties were formed when the hapten or hapten conjugated to BSA was bound. Thus, both the conformational isomers could bind antigen, at least when the antigen was a small hapten or a hapten conjugated to a carrier protein. Our results suggest that six out of 57 monoclonal IgG antibodies exist in equilibrium between at least two conformational forms and the biological significance of this isomerism is discussed.
|
|
| 3. |
- Hansson, Ulla-Britt, et al.
(författare)
-
Liquid-liquid Partition Chromatography
- 2000
-
Ingår i: Protein Liquid Chromatography (Journal of Chromatography Library ; 61). - 0444502106
-
Bokkapitel (övrigt vetenskapligt/konstnärligt)
|
|
| 4. |
- Malm, Joakim, et al.
(författare)
-
UTVÄRDERING AV SI-VERKSAMHETEN VID LUNDS UNIVERSITET 2019/20
- 2020
-
Rapport (övrigt vetenskapligt/konstnärligt)abstract
- Enkelt uttryckt är Samverkansinlärning (SI) en studiecirkel kopplat till en utmanande kurs. SI leds av en senior student som utformar läraktiviteter där studenterna arbetar i grupper med att förklara och förtydliga svårt kursmaterial. Målsättningen med SI, förutom förbättrade prestationer i den aktuella kursen, är att studenterna skall utveckla goda studiestrategier och bli mer självständiga i sitt lärande. Denna rapport behandlar SI-verksamheten vid Lunds universitet under läsåret 2019/20. Målsättningen är att läsaren skall få en god bild av hur SI bedrivs vid lärosätet och hur insatsen upplevs av deltagare och studentledare. Rapporten bygger dels på kvantitativa data – SI-närvaro samt närvaron kopplat till studenternas prestationer i SI-stödda kurser. Och dels på kvalitativa data från enkäter till deltagare och SI-ledare samt information frän metodhandledare och SI-koordinatorer.Under läsåret 2019/20 kompletterades undervisningen i 160 kurstillfällen av SI där totalt 235 studentledare ledde SI-pass. 4200 studenter vid universitetet deltog på passen under läsåret. Medelnärvaron var 25 % och 50 % av studenter med tillgång till SI provade på att besöka åtminstone ett pass. Dessa siffror betyder att SI-verksamheten vid Lunds universitet är en av de största vid lärosäten i Europa. SI-verksamheten följer också grundläggande SI-principer på ett bra sätt enligt deltagarna. Exempelvis på så sätt att deltagarna har ett stort inflytande över agendan på SI-passen och att arbetet med att förstå utmanande kursmaterial bedrivs genom arbete och diskussion i grupp. SI-ledaren ser till att arbetet går framåt genom att ställa frågor och uppmuntrardeltagarna att dela med sig av sina kunskaper till varandra. Studenternas drivkraft att gå på SI-passen är i huvudsak meningsorienterad genom att de vill få en bättre förståelse av ämnet och för att det är roligt att diskutera kursinnehåll med kurskamrater. Vad ger då deltagande på SI för närvarande studenter? Jämförelser av närvaro på SI och genomströmning på SI-stödd kurs antyder att chanserna att klara kursen vid ordinarie examination(er) ökar med ökad SI-närvaro. Deltagande studenter upplever dessutom i stor utsträckning att SI leder till att de bättre förstår vad som förväntas av dem i kursen, är ett effektivt stöd att ta sig fram i kursen, ökar intresset för ämnet och ger dem en djupare förståelse av kursinnehållet. Dessutom anser en stor andel avdeltagarna att de utvecklar generella färdigheter såsom problemlösning, kritiskt tänkande, lagarbete och presentation av akademiskt material inför andra. En betydande del av SI-deltagarna anger att de åtminstone till viss del de utvecklar sitt sätt att studera och förbättrar sitt akademiska självförtroende. Ca en fjärdedel av de svarande på enkäten anser att SI varit viktigt för att skaffa studiekamrater, vilket kan vara mycket betydelsefullt för att känna tillhörighet inom akademien och ge ytterligare motivation till fortsatta högre studier.De dominerande svarsteman på öppna enkätfrågor rörande vad som är bäst med SI samt vad som skiljer SI-pass från ordinarie undervisning är desamma för bägge frågorna. Det handlar om att deltagarna uppskattar diskussionen/samarbetet samt atmosfären och arbetsmiljön på passen. Vidare gillar studenterna fokus på djupare förståelse av kursinnehållet. På frågan vad man tycker kan förbättras med SI-passen anser en del av deltagarna att strukturen på passet ibland kan vara tydligare och att arbetet under passen ibland kan kännas ineffektivt.Aktiva SI-ledare och SI-ledaralumner i arbetslivet fick svara på enkäter rörande de färdigheter man tränar och utvecklar i sitt SI-arbete. Här framkom att de svarande generellt tyckte att de blivit bättre på ett flertal färdigheter inom områdena kommunikation, ledarskap och handhavande av grupper samt vissa personliga färdigheter. En stor majoritet av SI-ledaralumnerna ansåg dessutom SI-ledarskapet givit dem en fördel när de sökt jobb och att man haft god nytta av SI-färdigheterna i sitt yrkesverksamma liv. Enkätundersökningen avaktiva SI-ledare samt SI-ledaralumner vid Lunds Universitet var en del av en internationell undersökning där två andra SI-program vid North West University i Sydafrika och University of Missouri Kansas City ingick. Resultaten från enkäterna vid dessa lärosäten speglade resultaten från Lunds universitet. Således verkar SI-ledarna generellt vinna en hel del genom sin tjänstgöring, oavsett lärosäte och land, som de senare har nytta av i sitt yrkesverksamma liv.Under den andra hälften av vårterminen 2020 övergick SI-passen till att ges på distans pga Coronapandemin. Många metodhandledare och SI-ledare gjorde ett fantastiskt jobb med att snabbt ställa om verksamheten. Enkätsvar från deltagare på distans-SI visade att SI-passen var uppskattade och att fördelarna man fick från att delta motsvarade de som man får på reguljär sals-SI. Dock framträdde ett antal utmaningar. Närvaron var betydligt lägre på distans-SI jämfört med sals-SI. Mötena kändes ofta som lite mer tidsineffektiva när de gickpå distans, ledarna fick en svårare uppgift med att hålla reda på tekniken vid sidan av att leda SI-passet, och deltagarna/ledarna saknade den sociala dimensionen man får vid sals-SI med möjlighet att kunna snacka liteom annat och att kunna läsa av kroppsspråk. Möjligheten att prova på distans-SI vid Lunds universitet har varit berikande och gett inspiration till att utveckla konceptet. Distans SI bör även i mer normala tider kunna vara ett bra komplement till sals-SI vad gäller att stödja studenter i utmanande kurser. Speciellt vid distanskurser, men även för att stödja studenter som inte har möjlighet att delta på sals-SI, exempelvis pga föräldraskap, deltidsarbete, långa pendlingstider, mm mm.Under läsåret 2019/20 gjordes också en studie av läraktiviteter under SI-pass. Studien visade att de huvudsakliga aktiviteterna på SI-pass handlar om att förklara och tydliggöra det som är svårt i kursen. Men att man också avsätter betydande del av tiden för att få en djupare förståelse av det behandlade kursmaterialet genom analyserande och reflekterande aktiviteter.
|
|
| 5. |
- Malm, Joakim, et al.
(författare)
-
Utvärdering av SI-verksamheten vid Lunds universitet 2022/23
- 2023
-
Rapport (övrigt vetenskapligt/konstnärligt)abstract
- Enkelt uttryckt är Samverkansinlärning (SI) en studiecirkel kopplat till en utmanande kurs. SI leds av en senior student som utformar läraktiviteter där studenterna arbetar i grupper med att förklara och förtydliga svårt kursmaterial. Målsättningen med SI, förutom förbättrade prestationer i den aktuella kursen, är att studenterna skall utveckla goda studiestrategier och bli mer självständiga i sitt lärande. Denna rapport behandlar SI-verksamheten vid Lunds universitet under läsåret 2022/23. Målsättningen är att läsaren skall få en god bild av hur SI bedrivs vid lärosätet och hur insatsen upplevs av deltagare och studentledare. Rapporten bygger dels på kvantitativa data – SI-närvaro, samt närvaron kopplat till studenternas prestationer i SI-stödda kurser. Och dels på kvalitativa data från enkäter till deltagare och SI-ledare, dels information frän metodhandledare och SI-koordinatorer. Under läsåret 2022/23 kompletterades undervisningen i 204 kurstillfällen av SI där totalt 266 studentledare ledde SI-pass. 5200 studenter vid universitetet deltog på passen under läsåret. Medelnärvaron var 23 % och 53% av studenter med tillgång till SI provade på att besöka åtminstone ett pass. Dessa siffror betyder att SI-verksamheten vid Lunds universitet är en av de största vid lärosäten i Europa (SI finns på 75+ högre lärosäten i Europa). SI-verksamheten följer också grundläggande SI-principer på ett bra sätt enligt deltagarna. Exempelvis på så sätt att deltagarna har ett stort inflytande över agendan på SI-passen och att arbetet med att förstå utmanande kursmaterial bedrivs genom arbete och diskussion i grupp. SI-ledaren ser till att arbetet gårframåt genom att ställa frågor och uppmuntrar deltagarna att dela med sig av sina kunskaper till varandra.Studenternas drivkraft att gå på SI-passen är i huvudsak meningsorienterad genom att de vill få en bättre förståelse av ämnet och för att det är roligt att diskutera kursinnehåll med kurskamrater. Vad ger då deltagande på SI för närvarande studenter? Jämförelser av närvaro på SI och genomströmning på SI-stödd kurs antyder att chanserna att klara kursen vid ordinarie examination(er) ökar med ökad SI-närvaro. Deltagande studenter upplever dessutom i stor utsträckning att SI leder till att de bättre förstår vad som förväntas av dem i kursen, är ett effektivt stöd att ta sig fram i kursen, ökar intresset för ämnet och ger dem en djupare förståelse av kursinnehållet. Dessutom anser en stor andel av deltagarna att de utvecklar generella färdigheter såsom problemlösning, kritiskt tänkande, lagarbete och presentation av akademiskt material införandra. En betydande del av SI-deltagarna anger att de åtminstone till viss del utvecklar sitt sätt att studera och förbättrar sitt akademiska självförtroende. Lite mer än en fjärdedel av de svarande på enkäten anser att SI varit viktigt för att skaffa studiekamrater, vilket kan vara mycket betydelsefullt för att känna tillhörighet inom akademien och ge ytterligare motivation till fortsatta högre studier.De dominerande svarsteman på öppna enkätfrågor rörande vad som är bäst med SI samt vad som skiljer SI-pass från ordinarie undervisning är desamma för bägge frågorna. Det handlar om att deltagarna uppskattar diskussionen/samarbetet samt atmosfären och arbetsmiljön på passen. Vidare gillar studenterna fokus på djupare förståelse av kursinnehållet. På frågan vad man tycker kan förbättras med SI-passen anser en del av deltagarna att strukturen på passet ibland kan vara tydligare och att arbetet under passen ibland kan kännas ineffektivt.Det är roligt att konstatera att de allra flesta SI-ledarna trivs i sin roll, känner sig nöjda med sitt jobb och upplever att de gör skillnad för sina deltagare, baserat på deras enkätsvar. Dessutom utvecklar de i hög grad i olika färdigheter som kommunikation, grupphantering och ledarskap.
|
|
| 6. |
- Wingren, Christer, et al.
(författare)
-
A new approach to examine conformational changes occurring upon binding of ligand by biomolecules
- 1995
-
Ingår i: Biochimica et Biophysica Acta. General Subjects. - 0304-4165. ; 1244:1, s. 209-215
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- Liquid-liquid partition chromatography in an aqueous poly(ethylene glycol)/dextran two-phase system (LLPC) is shown to be a quick and sensitive method for detecting conformational changes occurring upon binding of ligands by biospecific molecules. Two groups of well-characterized proteins, enzymes and monoclonal antibodies, were employed. As an example, LLPC demonstrated that isoforms of lactate dehydrogenase as well as of hexokinase existed in a ligand-dependent equilibrium between two forms and that conformational changes occurred when monoclonal antibodies bound haptens. We also demonstrate that the method could be used to detect and separate subfractions in preparations of unliganded proteins that appeared to be homogeneous when analysed by other techniques.
|
|
| 7. |
- Wingren, Christer, et al.
(författare)
-
Antigen-binding sites dominate the surface properties of IgG antibodies
- 1995
-
Ingår i: Molecular Immunology. - 1872-9142 .- 0161-5890. ; 32:11, s. 819-827
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- A new technique, liquid-liquid partition chromatography in an aqueous polyethylene glycol-dextran two-phase system, was used to detect differences in surface properties of antibodies with different antigen-binding sites. Employing well-characterized monoclonal IgG antibodies and Fab and Fc fragments thereof as well as chimeric IgG antibodies we found a remarkable relationship between structure of the antibody combining site and chromatographic behaviour. The surface properties of the IgG antibodies were dominated by those of its antigen-binding regions. In addition, our results indicated that the constant parts of the IgGs form similar scaffoldings, on to which CDRs of variable shapes and sizes are interspaced and constitute the major dominant differences in exposed surface properties.
|
|
| 8. |
- Wingren, Christer, et al.
(författare)
-
Comparison of Surface Properties of Human IgA, IgE, IgG and IgM Antibodies with Identical and Different Specificities
- 1996
-
Ingår i: Scandinavian Journal of Immunology. - : Wiley. - 1365-3083 .- 0300-9475. ; 44:5, s. 430-436
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- In this paper, the authors report the use of liquid-liquid partition chromatography (LLPC) in an aqueous polyethylene glycol (PEG)/dextran two-phase system to compare the surface properties (partition properties) of human antibodies and fragments thereof. The surface properties of all the monoclonal antibodies of different classes and subclasses investigated were within the same broad range as that observed for the polyclonal antibodies and no relationship was found between the exposed surfaces of the immunoglobulins (Ig) and their heavy chain isotype. Moreover, Fc fragments from various IgG1, 2 and 4 myeloma proteins were found to exhibit similar surface properties. Employing chimeric antibodies with identical variable regions the authors found that intact IgG1, 2 and 4 displayed identical surface properties, while the corresponding IgA1, IgA2, IgG3, IgE and IgM antibodies differed both from each other and from the IgGs. The surface properties of chimeric IgG3 could be made similar to those of the IgG1, 2 and 4 chimers by partially reducing the length of the hinge section, but new differences in surface properties appeared when their hinges were of similar length. Thus, LLPC can be used to detect differences or similarities in the surface properties of the antigen-binding regions as well as the Fc part in the various isotypes. This can shed light on biological activities such as antigen binding and effector function.
|
|
| 9. |
|
|
| 10. |
- Wingren, Christer, et al.
(författare)
-
Enzyme conformational alterations detected by partition column chromatography
- 1996
-
Ingår i: Journal of Chromatography. B. - : Elsevier BV. - 1572-6495. ; 680:1-2, s. 113-122
-
Tidskriftsartikel (refereegranskat)abstract
- In this paper, we demonstrate the ability of liquid-liquid partition chromatography (LLPC) to detect conformational alterations occurring in well-characterized enzymes. The conformational changes induced in dehydrogenases such as alcohol dehydrogenase (ADH), glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH), lactate dehydrogenases (LDH) and malate dehydrogenase (MDH) upon binding of ligand(s) were detectable by LLPC. The ligand-dependent equilibrium between two forms of citrate synthase (CS), glutamate-oxaloacetate transaminase (GOT), hexokinase (HK) and 3-phosphoglycerate kinase (PGK) could also be demonstrated. Furthermore, different conformational forms of some of the apoenzymes could also be detected and separated by LLPC. The results obtained here are discussed in relation to those obtained by other methods.
|
|
