Sökning: onr:"swepub:oai:gup.ub.gu.se/260366" >
Ectopic expression ...
Ectopic expression of RAD52 and dn53BP1 improves homology-directed repair during CRISPR-Cas9 genome editing
-
Paulsen, B. S. (författare)
-
Mandal, P. K. (författare)
-
Frock, R. L. (författare)
-
visa fler...
-
Boyraz, B. (författare)
-
Yadav, R. (författare)
-
Upadhyayula, S. (författare)
-
Gutierrez-Martinez, P. (författare)
-
Ebina, W. (författare)
-
- Fasth, Anders, 1945 (författare)
- Gothenburg University,Göteborgs universitet,Institutionen för kliniska vetenskaper, Avdelningen för pediatrik,Institute of Clinical Sciences, Department of Pediatrics
-
Kirchhausen, T. (författare)
-
Talkowski, M. E. (författare)
-
Agarwal, S. (författare)
-
Alt, F. W. (författare)
-
Rossi, D. J. (författare)
-
visa färre...
-
(creator_code:org_t)
- 2017-10-09
- 2017
- Engelska.
-
Ingår i: Nature Biomedical Engineering. - : Springer Science and Business Media LLC. - 2157-846X. ; 1:11, s. 878-888
- Relaterad länk:
-
https://europepmc.or...
-
visa fler...
-
https://gup.ub.gu.se...
-
https://doi.org/10.1...
-
visa färre...
Abstract
Ämnesord
Stäng
- Gene disruption by clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-CRISPR-associated protein 9 (Cas9) is highly efficient and relies on the error-prone non-homologous end-joining pathway. Conversely, precise gene editing requires homology-directed repair (HDR), which occurs at a lower frequency than non-homologous end-joining in mammalian cells. Here, by testing whether manipulation of DNA repair factors improves HDR efficacy, we show that transient ectopic co-expression of RAD52 and a dominant-negative form of tumour protein p53-binding protein 1 (dn53BP1) synergize to enable efficient HDR using a single-stranded oligonucleotide DNA donor template at multiple loci in human cells, including patient-derived induced pluripotent stem cells. Co-expression of RAD52 and dn53BP1 improves multiplexed HDR-mediated editing, whereas expression of RAD52 alone enhances HDR with Cas9 nickase. Our data show that the frequency of non-homologous end-joining-mediated double-strand break repair in the presence of these two factors is not suppressed and suggest that dn53BP1 competitively antagonizes 53BP1 to augment HDR in combination with RAD52. Importantly, co-expression of RAD52 and dn53BP1 does not alter Cas9 off-target activity. These findings support the use of RAD52 and dn53BP1 co-expression to overcome bottlenecks that limit HDR in precision genome editing. © 2017 The Author(s).
Ämnesord
- MEDICIN OCH HÄLSOVETENSKAP -- Medicinska och farmaceutiska grundvetenskaper -- Cell- och molekylärbiologi (hsv//swe)
- MEDICAL AND HEALTH SCIENCES -- Basic Medicine -- Cell and Molecular Biology (hsv//eng)
Publikations- och innehållstyp
- ref (ämneskategori)
- art (ämneskategori)
Hitta via bibliotek
Till lärosätets databas
- Av författaren/redakt...
-
Paulsen, B. S.
-
Mandal, P. K.
-
Frock, R. L.
-
Boyraz, B.
-
Yadav, R.
-
Upadhyayula, S.
-
visa fler...
-
Gutierrez-Martin ...
-
Ebina, W.
-
Fasth, Anders, 1 ...
-
Kirchhausen, T.
-
Talkowski, M. E.
-
Agarwal, S.
-
Alt, F. W.
-
Rossi, D. J.
-
visa färre...
- Om ämnet
-
- MEDICIN OCH HÄLSOVETENSKAP
-
MEDICIN OCH HÄLS ...
-
och Medicinska och f ...
-
och Cell och molekyl ...
- Artiklar i publikationen
-
Nature Biomedica ...
- Av lärosätet
-
Göteborgs universitet