Tryptophan-tagged cutinase studied by steady state fluorescence for understanding of tag interactions in aqueous two-phase systems

↓ Direkt till sidans innehåll
↓ Direkt till sidans sekundära innehåll (sidomenyn)

Sökning: onr:"swepub:oai:lup.lub.lu.se:cf80fd2e-aadd-430a-83a3-09d4eb531205" > Tryptophan-tagged c...

1 av 1
Föregående post
Nästa post
Till träfflistan

Nilsson, AnnaLund University,Lunds universitet,Biokemi och Strukturbiologi,Centrum för Molekylär Proteinvetenskap,Kemiska institutionen,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Biochemistry and Structural Biology,Center for Molecular Protein Science,Department of Chemistry,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH (författare)

Tryptophan-tagged cutinase studied by steady state fluorescence for understanding of tag interactions in aqueous two-phase systems

Artikel/kapitelEngelska2003

Förlag, utgivningsår, omfång ...

2003

Nummerbeteckningar

LIBRIS-ID:oai:lup.lub.lu.se:cf80fd2e-aadd-430a-83a3-09d4eb531205
https://lup.lub.lu.se/record/124719URI
https://doi.org/10.1016/S1570-9639(02)00550-2DOI

Kompletterande språkuppgifter

Språk:engelska
Sammanfattning på:engelska

Ingår i deldatabas

SwePubSwePub

Klassifikation

Ämneskategori:art swepub-publicationtype
Ämneskategori:ref swepub-contenttype

Anmärkningar

Genetic engineering has been used to construct fusion proteins of Fusarium solani pisi cutinase and tryptophan-based tags, expressed in Saccharomyces cerevisiae, to increase the partitioning in aqueous two-phase systems. The separation systems were composed of thermoseparating polymers (random copolymers of ethylene oxide and propylene oxide, EOPO) and detergents (C12EOn). In this study, the fluorescence behaviour of the peptide-tagged protein, free peptide tag and tryptophan was investigated. The tryptophan-tagged proteins, cutinase-(WP)4 and cutinase-TGGSGG-(WP)4, showed emission spectra similar to the free peptides and tryptophan, indicating solvent exposure of the tag. The influence of polymers and detergents on the fluorescence of tagged proteins was examined. When peptides and tagged proteins were exposed to polymer, a slight blue shift of the emission maximum was observed. Larger blue shifts of the emission maximum were observed when C12EOn detergents were utilised. The results correlate with aqueous two-phase partitioning where addition of C12EOn detergents results in more extreme partitioning compared to systems containing only polymers. Dynamic light scattering (DLS) measurements of the EOPO copolymers were carried out, showing that the polymers did not aggregate at concentrations used in aqueous two-phase systems. Quenching of fluorescence with iodide for both proteins and peptide tags was studied. Plots according to the Stern-Volmer equation resulted in a linear fit, indicating exposed tryptophan residues for both free peptides and fusion proteins. The quenching constants were similar for both tagged protein and free peptide tag. The fluorescence results indicated that the tryptophan residues in the tag were exposed to the solvent and could interact with detergents and polymers in the two-phase systems.

Ämnesord och genrebeteckningar

NATURVETENSKAP Kemi Fysikalisk kemi hsv//swe
NATURAL SCIENCES Chemical Sciences Physical Chemistry hsv//eng
NATURVETENSKAP Biologi hsv//swe
NATURAL SCIENCES Biological Sciences hsv//eng
Cutinase
Quenching
Protein-peptide fusion
Fluorescence
Aqueous two-phase system
Tryptophan

Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)

Neves-Petersen, Maria Teresa (författare)
Johansson, Hans-OlofLund University,Lunds universitet,Biokemi och Strukturbiologi,Centrum för Molekylär Proteinvetenskap,Kemiska institutionen,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Biochemistry and Structural Biology,Center for Molecular Protein Science,Department of Chemistry,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH(Swepub:lu)biok-hoj (författare)
Jansson, JörgenLund University,Lunds universitet,Fysikalisk kemi,Enheten för fysikalisk och teoretisk kemi,Kemiska institutionen,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Physical Chemistry,Physical and theoretical chemistry,Department of Chemistry,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH(Swepub:lu)fk1-jja (författare)
Schillén, KarinLund University,Lunds universitet,Fysikalisk kemi,Enheten för fysikalisk och teoretisk kemi,Kemiska institutionen,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Physical Chemistry,Physical and theoretical chemistry,Department of Chemistry,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH(Swepub:lu)fk1-ksc (författare)
Tjerneld, FolkeLund University,Lunds universitet,Biokemi och Strukturbiologi,Centrum för Molekylär Proteinvetenskap,Kemiska institutionen,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Biochemistry and Structural Biology,Center for Molecular Protein Science,Department of Chemistry,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH(Swepub:lu)biok-ftj (författare)
Petersen, Steffen B (författare)
Biokemi och StrukturbiologiCentrum för Molekylär Proteinvetenskap (creator_code:org_t)

Sammanhörande titlar

Ingår i:Biochimica et Biophysica Acta - Proteins and Proteomics1646:1-2, s. 57-661570-9639

Internetlänk

Hitta via bibliotek

Biochimica et Biophysica Acta - Proteins and Proteomics (Sök värdpublikationen i LIBRIS)

Till lärosätets databas

1 av 1
Föregående post
Nästa post
Till träfflistan

Hitta mer i SwePub

Av författaren/redakt...: Nilsson, Anna; Neves-Petersen, ...; Johansson, Hans- ...; Jansson, Jörgen; Schillén, Karin; Tjerneld, Folke; visa fler...; Petersen, Steffe ...; visa färre...

Om ämnet

NATURVETENSKAP: NATURVETENSKAP; och Kemi; och Fysikalisk kemi

NATURVETENSKAP: NATURVETENSKAP; och Biologi

Artiklar i publikationen: Biochimica et Bi ...

Av lärosätet: Lunds universitet

Sök utanför SwePub

Sök vidare i:: Google; Google Book Search; Google Scholar

Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.

LIBRIS.kb.se