Localization of peroxisomal matrix proteins by photobleaching

Buch, CharlottaSödertörns högskola,Institutionen för livsvetenskaper,Södertorns högskola (författare)

Som manuskript i avhandling. As manuscript in dissertation.
The distribution of some enzymes between peroxisomes and cytosol, or a dual localization in both these compartments, can be difficult to reconcile. We have used photobleaching in live cells expressing green fluorescent protein (GFP)-fusion proteins to show that imported bona fide peroxisomal matrix proteins are retained in the peroxisome. The high mobility of the GFP-fusion proteins in the cytosol and absence of peroxisomal escape makes it possible to eliminate the cytosolic fluorescence by photobleaching, to distinguish between exclusively cytosolic proteins and proteins that are also present at low levels in peroxisomes. Using this technique we found that GFP tagged bile acid-CoA:amino acid N-acyltransferase (BAAT) was exclusively localized in the cytosol in HeLa cells. We conclude that the cytosolic localization was due to its carboxyterminal non-consensus peroxisomal targeting signal (-SQL) since mutation of the -SQL to -SKL resulted in BAAT being efficiently imported into peroxisomes.

Hunt, Mary CStockholms universitet,Institutionen för genetik, mikrobiologi och toxikologi(Swepub:su)mhunt (författare)
Alexson, Stefan E. H.Karolinska Institutet,Södertorns Högskola (författare)
Hallberg, EinarSödertörns högskola,Institutionen för livsvetenskaper(Swepub:sh)SHERHG (författare)
Södertörns högskolaInstitutionen för livsvetenskaper (creator_code:org_t)

Ingår i:Biochemical and Biophysical Research Communications - BBRC: Elsevier BV388:2, s. 355-3590006-291X1090-2104

Av författaren/redakt...: Buch, Charlotta; Hunt, Mary C; Alexson, Stefan ...; Hallberg, Einar

Om ämnet

Av lärosätet: Södertörns högskola; Karolinska Institutet; Stockholms universitet

Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.