SwePub
Sök i LIBRIS databas

  Utökad sökning

L773:1046 5928 OR L773:1096 0279
 

Sökning: L773:1046 5928 OR L773:1096 0279 > High-yield expressi...

  • Eriksson, Hanna M.,1978-Stockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik,Åke Wieslander (författare)

High-yield expression and purification of a monotopic membrane glycosyltransferase

  • Artikel/kapitelEngelska2009

Förlag, utgivningsår, omfång ...

  • Elsevier,2009
  • printrdacarrier

Nummerbeteckningar

  • LIBRIS-ID:oai:DiVA.org:su-29063
  • https://urn.kb.se/resolve?urn=urn:nbn:se:su:diva-29063URI
  • https://doi.org/10.1016/j.pep.2009.03.008DOI
  • https://urn.kb.se/resolve?urn=urn:nbn:se:umu:diva-25825URI

Kompletterande språkuppgifter

  • Språk:engelska
  • Sammanfattning på:engelska

Ingår i deldatabas

Klassifikation

  • Ämneskategori:ref swepub-contenttype
  • Ämneskategori:art swepub-publicationtype

Anmärkningar

  • Membrane proteins are essential to many cellular processes. However, the systematic study of membrane protein structure has been hindered by the difficulty in obtaining large quantities of these proteins. Protein overexpression using Escherichia coli is commonly used to produce large quantities of protein, but usually yields very little membrane protein. Furthermore, optimization of the expressing conditions, as well as the choice of detergent and other buffer components, is thought to be crucial for increasing the yield of stable and homogeneous protein. Herein we report high-yield expression and purification of a membrane-associated monotopic protein, the glycosyltransferase monoglucosyldiacylglycerol synthase (alMGS), in E. coli. Systematic optimization of protein expression was achieved through controlling a few basic expression parameters, including temperature and growth media, and the purifications were monitored using a fast and efficient size-exclusion chromatography (SEC) screening method. The latter method was shown to be a powerful tool for fast screening and for finding the optimal protein-stabilizing conditions. For alMGS it was found that the concentration of detergent was just as important as the type of detergent, and a low concentration of n-Dodecyl-β-D-maltoside (DDM) (~1× critical micelle concentration) was the best for keeping the protein stable and homogeneous. By using these simply methods to optimize the conditions for alMGS expression and purification, the final expression level increase by two orders of magnitude, reaching 170 mg of pure protein per litre culture.

Ämnesord och genrebeteckningar

Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)

  • Persson, Karina,1969-Umeå universitet,Kariologi,Karina Persson(Swepub:umu)kape0001 (författare)
  • Zhang, ShuguangMassachusetts Institute of Technology (författare)
  • Wieslander, ÅkeStockholms universitet,Institutionen för biokemi och biofysik(Swepub:su)awies (författare)
  • Stockholms universitetInstitutionen för biokemi och biofysik (creator_code:org_t)

Sammanhörande titlar

  • Ingår i:Protein Expression and Purification: Elsevier66:2, s. 143-1481046-59281096-0279

Internetlänk

Hitta via bibliotek

Till lärosätets databas

Hitta mer i SwePub

Av författaren/redakt...
Eriksson, Hanna ...
Persson, Karina, ...
Zhang, Shuguang
Wieslander, Åke
Om ämnet
NATURVETENSKAP
NATURVETENSKAP
och Biologi
och Biokemi och mole ...
Artiklar i publikationen
Protein Expressi ...
Av lärosätet
Stockholms universitet
Umeå universitet

Sök utanför SwePub

Wikipedia om författaren:
Hanna_M_Eriksson
Eriksson, Hanna M.,1978-
en

Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.

 
pil uppåt Stäng

Kopiera och spara länken för att återkomma till aktuell vy