Sökning: id:"swepub:oai:DiVA.org:uu-106237" >
Expression and puri...
-
Nilsson, PerUppsala universitet,Molekylärbiologi,Institutionen för cell- och molekylärbiologi
(författare)
Expression and purification of recombinant poly(A)-specific ribonuclease (PARN)
- Artikel/kapitelEngelska2006
Förlag, utgivningsår, omfång ...
-
Elsevier BV,2006
-
printrdacarrier
Nummerbeteckningar
-
LIBRIS-ID:oai:DiVA.org:uu-106237
-
https://urn.kb.se/resolve?urn=urn:nbn:se:uu:diva-106237URI
-
https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2006.02.025DOI
-
https://urn.kb.se/resolve?urn=urn:nbn:se:uu:diva-97048URI
Kompletterande språkuppgifter
-
Språk:engelska
-
Sammanfattning på:engelska
Ingår i deldatabas
Klassifikation
-
Ämneskategori:ref swepub-contenttype
-
Ämneskategori:art swepub-publicationtype
Anmärkningar
-
PARN is a poly(A)-specific ribonuclease that degrades the poly(A) tail of mRNA. We have established conditions for expressing soluble recombinant human PARN. We investigated different Escherichia coli strains, expression vectors, media and growth conditions. We found that PARN expressed from pET33 in BL21(DE3) grown in TB and induced at OD595 approximately 1 with 1 mM IPTG yielded mg amounts of soluble PARN per litre culture. Further, a purification protocol was established to purify PARN. We use His-tag affinity chromatography, HiTrap Q HP ion exchange chromatography and 7-Me-GTP-Sepharose affinity chromatography. This purification procedure render a 90-95% pure PARN. Purified recombinant PARN has enzymatic activity and will be used for further mechanistic and structural studies.
Ämnesord och genrebeteckningar
Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)
-
Virtanen, AndersUppsala universitet,Molekylärbiologi
(författare)
-
Uppsala universitetMolekylärbiologi
(creator_code:org_t)
Sammanhörande titlar
-
Ingår i:International Journal of Biological Macromolecules: Elsevier BV39, s. 95-990141-81301879-0003
-
Ingår i:Int. J. Biol. Macromol. (BIOMAC): Elsevier BV39, s. 95-99
Internetlänk
Hitta via bibliotek
Till lärosätets databas