Sökning: onr:"swepub:oai:DiVA.org:uu-232888" >
Expression, purific...
-
Lee, Ho-Hsien
(författare)
Expression, purification and crystallization of CTB-MPR, a candidate mucosal vaccine component against HIV-1
- Artikel/kapitelEngelska2014
Förlag, utgivningsår, omfång ...
Nummerbeteckningar
-
LIBRIS-ID:oai:DiVA.org:uu-232888
-
https://urn.kb.se/resolve?urn=urn:nbn:se:uu:diva-232888URI
-
https://doi.org/10.1107/S2052252514014900DOI
Kompletterande språkuppgifter
-
Språk:engelska
-
Sammanfattning på:engelska
Ingår i deldatabas
Klassifikation
-
Ämneskategori:ref swepub-contenttype
-
Ämneskategori:art swepub-publicationtype
Anmärkningar
-
CTB-MPR is a fusion protein between the B subunit of cholera toxin (CTB) andthe membrane-proximal region of gp41 (MPR), the transmembrane envelopeprotein ofHuman immunodeficiency virus 1(HIV-1), and has previously beenshown to induce the production of anti-HIV-1 antibodies with antiviralfunctions. To further improve the design of this candidate vaccine, X-raycrystallography experiments were performed to obtain structural informationabout this fusion protein. Several variants of CTB-MPR were designed,constructed and recombinantly expressed inEscherichia coli. The first variantcontained a flexible GPGP linker between CTB and MPR, and yielded crystalsthat diffracted to a resolution of 2.3 A ̊, but only the CTB region was detectedin the electron-density map. A second variant, in which the CTB was directlyattached to MPR, was shown to destabilize pentamer formation. A thirdconstruct containing a polyalanine linker between CTB and MPR proved tostabilize the pentameric form of the protein during purification. The purificationprocedure was shown to produce a homogeneously pure and monodispersesample for crystallization. Initial crystallization experiments led to pseudo-crystals which were ordered in only two dimensions and were disordered inthe third dimension. Nanocrystals obtained using the same precipitant showedpromising X-ray diffraction to 5 A ̊resolution in femtosecond nanocrystallo-graphy experiments at the Linac Coherent Light Source at the SLAC NationalAccelerator Laboratory. The results demonstrate the utility of femtosecondX-ray crystallography to enable structural analysis based on nano/microcrystalsof a protein for which no macroscopic crystals ordered in three dimensions havebeen observed before.
Ämnesord och genrebeteckningar
Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)
-
Cherni, Irene
(författare)
-
Yu, HongQi
(författare)
-
Fromme, Raimund
(författare)
-
Doran, Jeffrey D.
(författare)
-
Grotjohann, Ingo
(författare)
-
Mittman, Michele
(författare)
-
Basu, Shibom
(författare)
-
Deb, Arpan
(författare)
-
Dörner, Katerina
(författare)
-
Aquila, Andrew
(författare)
-
Barty, Anton
(författare)
-
Boutet, Sébastien
(författare)
-
Chapman, Henry N.
(författare)
-
Doak, R. Bruce
(författare)
-
Hunter, Mark S.
(författare)
-
James, Daniel
(författare)
-
Kirian, Richard A.
(författare)
-
Kupitz, Christopher
(författare)
-
Lawrence, Robert M.
(författare)
-
Liu, Haiguang
(författare)
-
Nass, Karol
(författare)
-
Schlichting, Ilme
(författare)
-
Schmidt, Kevin E.
(författare)
-
Seibert, M. MarvinLinac Coherent Light Source, SLAC National Accelerator Laboratory, 2575 Sand Hill Road, Menlo Park, CA 94025, USA,(Swepub:uu)masei255
(författare)
-
Shoeman, Robert L.
(författare)
-
Spence, John C. H.
(författare)
-
Stellato, Francesco
(författare)
-
Weierstall, Uwe
(författare)
-
Williams, Garth J.
(författare)
-
Yoon, Chunhong
(författare)
-
Wang, Dingjie
(författare)
-
Zatsepin, Nadia A.
(författare)
-
Hogue, Brenda G.
(författare)
-
Matoba, Nobuyuki
(författare)
-
Fromme, Petra
(författare)
-
Mor, Tsafrir S.
(författare)
-
Linac Coherent Light Source, SLAC National Accelerator Laboratory, 2575 Sand Hill Road, Menlo Park, CA 94025, USA,
(creator_code:org_t)
Sammanhörande titlar
-
Ingår i:IUCrJ1:5, s. 305-3172052-2525
Internetlänk
Hitta via bibliotek
-
IUCrJ
(Sök värdpublikationen i LIBRIS)
Till lärosätets databas
- Av författaren/redakt...
-
Lee, Ho-Hsien
-
Cherni, Irene
-
Yu, HongQi
-
Fromme, Raimund
-
Doran, Jeffrey D ...
-
Grotjohann, Ingo
-
visa fler...
-
Mittman, Michele
-
Basu, Shibom
-
Deb, Arpan
-
Dörner, Katerina
-
Aquila, Andrew
-
Barty, Anton
-
Boutet, Sébastie ...
-
Chapman, Henry N ...
-
Doak, R. Bruce
-
Hunter, Mark S.
-
James, Daniel
-
Kirian, Richard ...
-
Kupitz, Christop ...
-
Lawrence, Robert ...
-
Liu, Haiguang
-
Nass, Karol
-
Schlichting, Ilm ...
-
Schmidt, Kevin E ...
-
Seibert, M. Marv ...
-
Shoeman, Robert ...
-
Spence, John C. ...
-
Stellato, France ...
-
Weierstall, Uwe
-
Williams, Garth ...
-
Yoon, Chunhong
-
Wang, Dingjie
-
Zatsepin, Nadia ...
-
Hogue, Brenda G.
-
Matoba, Nobuyuki
-
Fromme, Petra
-
Mor, Tsafrir S.
-
visa färre...
- Om ämnet
-
- NATURVETENSKAP
-
NATURVETENSKAP
-
och Biologi
-
och Biokemi och mole ...
- Artiklar i publikationen
-
IUCrJ
- Av lärosätet
-
Uppsala universitet