L773:0003 9861 OR L773:1096 0384
Sökning: L773:0003 9861 OR L773:1096 0384 > (2005-2009) > Expression of manga...
- Cristea, MirelaUppsala universitet,Institutionen för farmaceutisk biovetenskap (författare)
Expression of manganese lipoxygenase in Pichia pastoris and site-directed mutagenesis of putative manganese ligands
- Artikel/kapitelEngelska2005
Förlag, utgivningsår, omfång ...
- Elsevier BV,2005
- printrdacarrier
Nummerbeteckningar
- LIBRIS-ID:oai:DiVA.org:uu-94110
- https://urn.kb.se/resolve?urn=urn:nbn:se:uu:diva-94110URI
- https://doi.org/10.1016/j.abb.2004.10.026DOI
Kompletterande språkuppgifter
- Språk:engelska
- Sammanfattning på:engelska
Ingår i deldatabas
- SwePubSwePub
Klassifikation
Anmärkningar
- Manganese lipoxygenase is secreted by the fungus Gaeumannomyces graminis. We expressed the enzyme in Pichia pastoris, which secreted approximately 30 mg Mn-lipoxygenase/L culture medium in fermentor. The recombinant lipoxygenase was N- and O-glycosylated (80-100 kDa), contained approximately 1 mol Mn/mol protein, and had similar kinetic properties (K(m) approximately 7.1 microM alpha-linolenic acid and V(max) 18 nmol/min/microg) as the native Mn-lipoxygenase. Mn-lipoxygenase could be quantitatively converted, presumably by secreted Pichia proteases, to a smaller protein (approximately 67 kDa) with retention of lipoxygenase activity (K(m) approximately 6.4 microM alpha-linolenic acid and V(max) approximately 12 nmol/min/microg). Putative manganese ligands were investigated by site-directed mutagenesis. The iron ligands of soybean lipoxygenase-1 are two His residues in the sequence HWLNTH, one His residue and a distant Asn residue in the sequence HAAVNFGQ, and the C-terminal Ile residue. The homologous sequences of Mn-lipoxygenase are H274VLFH278 and H462HVMN466QGS, respectively, and the C-terminal amino acid is Val-602. The His274Gln, His278Glu, His462Glu, and the Val-602 deletion mutants of Mn-lipoxygenase were inactive, and had lost >95% of the manganese content. His-463, Asn-466, and Gln-467 did not appear to be critical for Mn-lipoxygenase activity, as His463Gln, Asn466Gln, Asn466Leu, and Gln467Asn mutants metabolized alpha-linolenic acid to 11- and 13-hydroperoxylinolenic acids. We conclude that His-274, His-278, His-462, and Val-602 likely coordinate manganese.
Ämnesord och genrebeteckningar
Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)
- Engström, ÅkeUppsala universitet,Institutionen för medicinsk biokemi och mikrobiologi(Swepub:uu)akeengs (författare)
- Su, ChaoUppsala universitet,Institutionen för farmaceutisk biovetenskap (författare)
- Hörnsten, Lena (författare)
- Oliw, Ernst H.Uppsala universitet,Institutionen för farmaceutisk biovetenskap (författare)
- Uppsala universitetInstitutionen för farmaceutisk biovetenskap (creator_code:org_t)
Sammanhörande titlar
- Ingår i:Archives of Biochemistry and Biophysics: Elsevier BV434:1, s. 201-2110003-98611096-0384
Internetlänk
Hitta via bibliotek
- Archives of Biochemistry and Biophysics (Sök värdpublikationen i LIBRIS)
Till lärosätets databas
Hitta mer i SwePub
- Av författaren/redakt...
- Cristea, Mirela
- Engström, Åke
- Su, Chao
- Hörnsten, Lena
- Oliw, Ernst H.
- Om ämnet
-
- MEDICIN OCH HÄLSOVETENSKAP
- MEDICIN OCH HÄLS ...
- och Medicinska och f ...
- och Farmaceutiska ve ...
- Artiklar i publikationen
- Archives of Bioc ...
- Av lärosätet
- Uppsala universitet
Sök utanför SwePub
- Sök vidare i:
- Google Book Search
- Google Scholar
Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.
- Copyright © LIBRIS - Nationella bibliotekssystem
- LIBRIS.kb.se
