Sökning: WFRF:(Schmidt Kevin E.) >
Expression, purific...
Expression, purification and crystallization of CTB-MPR, a candidate mucosal vaccine component against HIV-1
-
Lee, Ho-Hsien (författare)
-
Cherni, Irene (författare)
-
Yu, HongQi (författare)
-
visa fler...
-
Fromme, Raimund (författare)
-
Doran, Jeffrey D. (författare)
-
Grotjohann, Ingo (författare)
-
Mittman, Michele (författare)
-
Basu, Shibom (författare)
-
Deb, Arpan (författare)
-
Dörner, Katerina (författare)
-
Aquila, Andrew (författare)
-
Barty, Anton (författare)
-
Boutet, Sébastien (författare)
-
Chapman, Henry N. (författare)
-
Doak, R. Bruce (författare)
-
Hunter, Mark S. (författare)
-
James, Daniel (författare)
-
Kirian, Richard A. (författare)
-
Kupitz, Christopher (författare)
-
Lawrence, Robert M. (författare)
-
Liu, Haiguang (författare)
-
Nass, Karol (författare)
-
Schlichting, Ilme (författare)
-
Schmidt, Kevin E. (författare)
-
- Seibert, M. Marvin (författare)
- Linac Coherent Light Source, SLAC National Accelerator Laboratory, 2575 Sand Hill Road, Menlo Park, CA 94025, USA,
-
Shoeman, Robert L. (författare)
-
Spence, John C. H. (författare)
-
Stellato, Francesco (författare)
-
Weierstall, Uwe (författare)
-
Williams, Garth J. (författare)
-
Yoon, Chunhong (författare)
-
Wang, Dingjie (författare)
-
Zatsepin, Nadia A. (författare)
-
Hogue, Brenda G. (författare)
-
Matoba, Nobuyuki (författare)
-
Fromme, Petra (författare)
-
Mor, Tsafrir S. (författare)
-
visa färre...
-
(creator_code:org_t)
- 2014
- 2014
- Engelska.
-
Ingår i: IUCrJ. - 2052-2525. ; 1:5, s. 305-317
- Relaterad länk:
-
http://dx.doi.org/10...
-
visa fler...
-
https://urn.kb.se/re...
-
https://doi.org/10.1...
-
visa färre...
Abstract
Ämnesord
Stäng
- CTB-MPR is a fusion protein between the B subunit of cholera toxin (CTB) andthe membrane-proximal region of gp41 (MPR), the transmembrane envelopeprotein ofHuman immunodeficiency virus 1(HIV-1), and has previously beenshown to induce the production of anti-HIV-1 antibodies with antiviralfunctions. To further improve the design of this candidate vaccine, X-raycrystallography experiments were performed to obtain structural informationabout this fusion protein. Several variants of CTB-MPR were designed,constructed and recombinantly expressed inEscherichia coli. The first variantcontained a flexible GPGP linker between CTB and MPR, and yielded crystalsthat diffracted to a resolution of 2.3 A ̊, but only the CTB region was detectedin the electron-density map. A second variant, in which the CTB was directlyattached to MPR, was shown to destabilize pentamer formation. A thirdconstruct containing a polyalanine linker between CTB and MPR proved tostabilize the pentameric form of the protein during purification. The purificationprocedure was shown to produce a homogeneously pure and monodispersesample for crystallization. Initial crystallization experiments led to pseudo-crystals which were ordered in only two dimensions and were disordered inthe third dimension. Nanocrystals obtained using the same precipitant showedpromising X-ray diffraction to 5 A ̊resolution in femtosecond nanocrystallo-graphy experiments at the Linac Coherent Light Source at the SLAC NationalAccelerator Laboratory. The results demonstrate the utility of femtosecondX-ray crystallography to enable structural analysis based on nano/microcrystalsof a protein for which no macroscopic crystals ordered in three dimensions havebeen observed before.
Ämnesord
- NATURVETENSKAP -- Biologi -- Biokemi och molekylärbiologi (hsv//swe)
- NATURAL SCIENCES -- Biological Sciences -- Biochemistry and Molecular Biology (hsv//eng)
Publikations- och innehållstyp
- ref (ämneskategori)
- art (ämneskategori)
Hitta via bibliotek
-
IUCrJ
(Sök värdpublikationen i LIBRIS)
Till lärosätets databas
- Av författaren/redakt...
-
Lee, Ho-Hsien
-
Cherni, Irene
-
Yu, HongQi
-
Fromme, Raimund
-
Doran, Jeffrey D ...
-
Grotjohann, Ingo
-
visa fler...
-
Mittman, Michele
-
Basu, Shibom
-
Deb, Arpan
-
Dörner, Katerina
-
Aquila, Andrew
-
Barty, Anton
-
Boutet, Sébastie ...
-
Chapman, Henry N ...
-
Doak, R. Bruce
-
Hunter, Mark S.
-
James, Daniel
-
Kirian, Richard ...
-
Kupitz, Christop ...
-
Lawrence, Robert ...
-
Liu, Haiguang
-
Nass, Karol
-
Schlichting, Ilm ...
-
Schmidt, Kevin E ...
-
Seibert, M. Marv ...
-
Shoeman, Robert ...
-
Spence, John C. ...
-
Stellato, France ...
-
Weierstall, Uwe
-
Williams, Garth ...
-
Yoon, Chunhong
-
Wang, Dingjie
-
Zatsepin, Nadia ...
-
Hogue, Brenda G.
-
Matoba, Nobuyuki
-
Fromme, Petra
-
Mor, Tsafrir S.
-
visa färre...
- Om ämnet
-
- NATURVETENSKAP
-
NATURVETENSKAP
-
och Biologi
-
och Biokemi och mole ...
- Artiklar i publikationen
-
IUCrJ
- Av lärosätet
-
Uppsala universitet