SwePub
Sök i LIBRIS databas

  Utökad sökning

WFRF:(Booth P.)
 

Sökning: WFRF:(Booth P.) > (2005-2009) > Exceptional overpro...

  • Nyblom, Anna Maria,1975Chalmers tekniska högskola,Chalmers University of Technology (författare)

Exceptional overproduction of a functional human membrane protein

  • Artikel/kapitelEngelska2007

Förlag, utgivningsår, omfång ...

  • Elsevier BV,2007

Nummerbeteckningar

  • LIBRIS-ID:oai:gup.ub.gu.se/80912
  • https://gup.ub.gu.se/publication/80912URI
  • https://doi.org/10.1016/j.pep.2007.07.007DOI
  • https://research.chalmers.se/publication/80912URI

Kompletterande språkuppgifter

  • Språk:engelska

Ingår i deldatabas

Klassifikation

  • Ämneskategori:ref swepub-contenttype
  • Ämneskategori:art swepub-publicationtype

Anmärkningar

  • Eukaryotic-especially human-membrane protein overproduction remains a major challenge in biochemistry. Heterologously overproduced and purified proteins provide a starting point for further biochemical, biophysical and structural studies, and the lack of sufficient quantities of functional membrane proteins is frequently a bottleneck hindering this. Here, we report exceptionally high production levels of a correctly folded and crystallisable recombinant human integral membrane protein in its active form; human aquaporin 1 (hAQP1) has been heterologously produced in the membranes of the methylotrophic yeast Pichia pastoris. After solubilisation and a two step purification procedure, at least 90 mg hAQP1 per liter of culture is obtained. Water channel activity of this purified hAQP was verified by reconstitution into proteoliposomes and performing stopped-flow vesicle shrinkage measurements. Mass spectrometry confirmed the identity of hAQPI in crude membrane preparations, and also from purified protein reconstituted into proteoliposomes. Furthermore, crystallisation screens yielded diffraction quality crystals of untagged recombinant hAQP1. This study illustrates the power of the yeast P. pastoris as a host to produce exceptionally high yields of a functionally active, human integral membrane protein for subsequent functional and structural characterization. (c) 2007 Elsevier Inc. All rights reserved.

Ämnesord och genrebeteckningar

  • NATURVETENSKAP Kemi hsv//swe
  • NATURAL SCIENCES Chemical Sciences hsv//eng
  • overproduction
  • Pichia pastoris
  • mass spectrometry
  • crystallisation
  • proteoliposomes
  • fermentation
  • YEAST PICHIA-PASTORIS
  • CHIP28 WATER CHANNEL
  • CRYSTAL-STRUCTURE
  • STRUCTURAL BASIS
  • ELECTRON CRYSTALLOGRAPHY
  • SACCHAROMYCES-CEREVISIAE
  • ACETYLCHOLINE-RECEPTOR
  • MOLECULAR-BASIS
  • DRUG DISCOVERY
  • NMR STRUCTURE
  • DRUG DISCOVERY

Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)

  • Öberg, Fredrik,1982Gothenburg University,Göteborgs universitet,Institutionen för kemi,Department of Chemistry,University of Gothenburg(Swepub:gu)xobefr (författare)
  • Lindkvist-Petersson, KarinGothenburg University,Göteborgs universitet,Institutionen för cell- och molekylärbiologi,Department of Cell and Molecular Biology,University of Gothenburg(Swepub:gu)xlkarc (författare)
  • Hallgren, KarinGothenburg University,Göteborgs universitet,Institutionen för kemi,Department of Chemistry,University of Gothenburg(Swepub:gu)xhkarc (författare)
  • Findlay, H.University of Bristol (författare)
  • Wikstrom, J.Chalmers tekniska högskola,Chalmers University of Technology (författare)
  • Karlsson, A.Chalmers tekniska högskola,Chalmers University of Technology (författare)
  • Hansson, Örjan,1955Gothenburg University,Göteborgs universitet,Institutionen för kemi,Department of Chemistry,University of Gothenburg(Swepub:gu)xhanor (författare)
  • Booth, P. J.University of Bristol (författare)
  • Bill, Roslyn M.Aston University (författare)
  • Neutze, Richard,1969Gothenburg University,Göteborgs universitet,Institutionen för kemi,Department of Chemistry,University of Gothenburg,Chalmers tekniska högskola,Chalmers University of Technology(Swepub:cth)xneuri (författare)
  • Hedfalk, Kristina,1969Gothenburg University,Göteborgs universitet,Institutionen för kemi,Department of Chemistry,Chalmers tekniska högskola,Chalmers University of Technology,University of Gothenburg(Swepub:gu)xhedkr (författare)
  • Chalmers tekniska högskolaInstitutionen för kemi (creator_code:org_t)

Sammanhörande titlar

  • Ingår i:Protein Expression and Purification: Elsevier BV56:1, s. 110-1201046-59281096-0279

Internetlänk

Hitta via bibliotek

Till lärosätets databas

Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.

 
pil uppåt Stäng

Kopiera och spara länken för att återkomma till aktuell vy