SwePub
Sök i LIBRIS databas

  Utökad sökning

L773:1940 6029
 

Sökning: L773:1940 6029 > (2005-2009) > Adenovirus-mediated...

  • Ahmad, Faiyaz (författare)

Adenovirus-mediated overexpression of murine cyclic nucleotide phosphodiesterase 3B

  • Artikel/kapitelEngelska2005

Förlag, utgivningsår, omfång ...

  • New Jersey :Humana Press,2005

Nummerbeteckningar

  • LIBRIS-ID:oai:lup.lub.lu.se:4312a7b6-0dc4-4d74-972d-30de24666161
  • https://lup.lub.lu.se/record/1132243URI
  • https://doi.org/10.1385/1-59259-839-0:093DOI

Kompletterande språkuppgifter

  • Språk:engelska
  • Sammanfattning på:engelska

Ingår i deldatabas

Klassifikation

  • Ämneskategori:kap swepub-publicationtype
  • Ämneskategori:vet swepub-contenttype

Anmärkningar

  • To construct the recombinant adenovirus vector containing the cDNA for recombinant mouse cyclic nucleotide phosphodiesterase 3B (mPDE3B), the cDNA for mPDE3B was subcloned into pACCMV.pLpA. Subsequently, this recombinant plasmid, pACCMV.mPDE3B, was cotransfected with pJM17 plasmid containing the adenoviral genome into 293 human embryonic kidney cells, and the replication-deficient adenovirus AdCMV.mPDE3B was generated via homologous recombination. Large-scale preparation of adenovirus yielded 10(11)-10(13) viral particles/mL and could be quantitated by real-time polymerase chain reaction using iCycler (Bio-Rad). Efficiency of gene transfer was assessed by infecting FDCP2 or H4IIE cells with a recombinant adenovirus expressing beta-galactosidase (beta-gal); greater than 75% of cells were infected. Expression of mPDE3B in H4IIE hepatoma cells, FDCP2 hematopoietic cells, and beta-cells from isolated pancreatic islets was detected by Western blot analysis. In lysates from FDCP2 cells and H4IIE hepatoma cells infected with recombinant adenoviral mPDE3B constructs, mPDE3B activity was increased 10- to 30-fold compared with the activity in lysates from cells infected with beta-gal adenovirus. Stimulation of FDCP2 cells infected with mPDE3B adenovirus with insulin (100 nM, 10 min) resulted in an approx 1.7-fold increase in endogenous PDE3B and recombinant wild-type PDE3B activities. Infection of rat pancreatic islets resulted in a 5- to 10-fold increase in PDE3B expression and activity and subsequent blunting of insulin secretion. Thus, adenovirus-mediated gene transfer is effective for studying expression and regulation of recombinant PDE3 in insulin-responsive cells as well as insulin-secreting cells.

Ämnesord och genrebeteckningar

Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)

  • Härndahl, LindaLund University,Lunds universitet,Institutionen för experimentell medicinsk vetenskap,Medicinska fakulteten,Department of Experimental Medical Science,Faculty of Medicine(Swepub:lu)medk-lha (författare)
  • Tang, Yan (författare)
  • Stenson, LenaLund University,Lunds universitet,Signaltransduktionsforskning,Forskargrupper vid Lunds universitet,Insulin Signal Transduction,Lund University Research Groups(Swepub:lu)medk-lsh (författare)
  • Manganiello, Vincent C (författare)
  • Institutionen för experimentell medicinsk vetenskapMedicinska fakulteten (creator_code:org_t)

Sammanhörande titlar

  • Ingår i:Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)New Jersey : Humana Press307, s. 93-1071940-60291064-3745

Internetlänk

Hitta via bibliotek

Till lärosätets databas

Hitta mer i SwePub

Av författaren/redakt...
Ahmad, Faiyaz
Härndahl, Linda
Tang, Yan
Stenson, Lena
Manganiello, Vin ...
Om ämnet
MEDICIN OCH HÄLSOVETENSKAP
MEDICIN OCH HÄLS ...
och Klinisk medicin
och Endokrinologi oc ...
Artiklar i publikationen
Methods in molec ...
Av lärosätet
Lunds universitet

Sök utanför SwePub

Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.

 
pil uppåt Stäng

Kopiera och spara länken för att återkomma till aktuell vy