Purification of plasmid DNA with a new type of anion-exchange beads having a non-charged surface

↓ Direkt till sidans innehåll
↓ Direkt till sidans sekundära innehåll (sidomenyn)

Sökning: WFRF:(Lemmens P) > (2000-2004) > Purification of pla...

1 av 1
Föregående post
Nästa post
Till träfflistan

Gustavsson, Per-ErikLund University,Lunds universitet,Tillämpad biokemi,Centrum för tillämpade biovetenskaper,Kemiska institutionen,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Pure and Applied Biochemistry,Center for Applied Life Sciences,Department of Chemistry,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH (författare)

Purification of plasmid DNA with a new type of anion-exchange beads having a non-charged surface

Artikel/kapitelEngelska2004

Förlag, utgivningsår, omfång ...

Elsevier BV,2004

Nummerbeteckningar

LIBRIS-ID:oai:lup.lub.lu.se:d7be1e4e-faa0-43ba-a3ae-96ddb109db4d
https://lup.lub.lu.se/record/141027URI
https://doi.org/10.1016/j.chroma.2004.03.050DOI

Kompletterande språkuppgifter

Språk:engelska
Sammanfattning på:engelska

Ingår i deldatabas

SwePubSwePub

Klassifikation

Ämneskategori:art swepub-publicationtype
Ämneskategori:ref swepub-contenttype

Anmärkningar

We have prepared a new type of anion exchanger, which effectively discriminates between RNA and plasmid DNA. The material is based on a Sephacryl S-500 HR matrix provided with quartenary amine anion-exchange groups. A distinguishing feature of the beads is that a thin (2-3 mum) outer layer of the beads lacks ion-exchange groups. In the synthesis of these beads the vinyl groups in the outer layer of vinylalkyl substituted Sephacryl S-500 HR beads are reacted with bromine. The resulting layer of bromoalkyl groups are hydrolysed, creating an inert outer layer of hydroxyalkyl groups. Finally, bromination and trimethylamine reactions of the inner vinyl groups provide the beads with a core of cationic groups. Large plasmid molecules will not bind to such beads since they are too large to enter the pores and therefore cannot come into contact with the charged matrix in the inner parts of the beads. RNA and protein molecules present in a cleared lysate, on the other hand, readily enter the pores and become adsorbed. A two-column strategy was developed for plasmid purification (recombinant pBluescript, 5.9 kilo base pairs, kbp). The first column was packed with the restricted access anion-exchanger beads (lid beads) and the second column with normal ion-exchange material (same ligand density as the lid beads). Diluted (3 x), cleared lysate was pumped through the tandem columns. The first column was subsequently disconnected from the system and the purified plasmid adsorbed on the second column was eluted in a concentrated form (6x) and with 89% recovery. The two-column procedure removed 99.5% of the RNA and 96% of the proteins. (C) 2004 Elsevier B.V. All rights reserved.

Ämnesord och genrebeteckningar

NATURVETENSKAP Biologi Biokemi och molekylärbiologi hsv//swe
NATURAL SCIENCES Biological Sciences Biochemistry and Molecular Biology hsv//eng
Restricted access material
Anion exchangers
Stationary phases
LC
Coupled columns
DNA
RNA

Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)

Lemmens, R (författare)
Nyhammar, T (författare)
Busson, P (författare)
Larsson, Per-OlofLund University,Lunds universitet,Tillämpad biokemi,Centrum för tillämpade biovetenskaper,Kemiska institutionen,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Pure and Applied Biochemistry,Center for Applied Life Sciences,Department of Chemistry,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH(Swepub:lu)tbk-pol (författare)
Tillämpad biokemiCentrum för tillämpade biovetenskaper (creator_code:org_t)

Sammanhörande titlar

Ingår i:Journal of Chromatography A: Elsevier BV1038:1-2, s. 131-1400021-9673

Internetlänk

Hitta via bibliotek

Journal of Chromatography A (Sök värdpublikationen i LIBRIS)

Till lärosätets databas

1 av 1
Föregående post
Nästa post
Till träfflistan

Hitta mer i SwePub

Av författaren/redakt...: Gustavsson, Per- ...; Lemmens, R; Nyhammar, T; Busson, P; Larsson, Per-Olo ...

Om ämnet

NATURVETENSKAP: NATURVETENSKAP; och Biologi; och Biokemi och mole ...

Artiklar i publikationen: Journal of Chrom ...

Av lärosätet: Lunds universitet

Sök utanför SwePub

Sök vidare i:: Google; Google Book Search; Google Scholar

Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.

LIBRIS.kb.se