Modulating heterologous protein production in yeast: the applicability of truncated auxotrophic markers

↓ Direkt till sidans innehåll
↓ Direkt till sidans sekundära innehåll (sidomenyn)

Sökning: onr:"swepub:oai:research.chalmers.se:916606a0-cf55-410b-b893-3ad0bf6d2c47" > Modulating heterolo...

1 av 1
Föregående post
Nästa post
Till träfflistan

Kazemi Seresht, Ali,1980Chalmers tekniska högskola,Chalmers University of Technology (författare)

Modulating heterologous protein production in yeast: the applicability of truncated auxotrophic markers

Artikel/kapitelEngelska2013

Förlag, utgivningsår, omfång ...

2012-07-11
Springer Science and Business Media LLC,2013

Nummerbeteckningar

LIBRIS-ID:oai:research.chalmers.se:916606a0-cf55-410b-b893-3ad0bf6d2c47
https://doi.org/10.1007/s00253-012-4263-1DOI
https://research.chalmers.se/publication/178099URI

Kompletterande språkuppgifter

Språk:engelska
Sammanfattning på:engelska

Ingår i deldatabas

SwePubSwePub

Klassifikation

Ämneskategori:art swepub-publicationtype
Ämneskategori:ref swepub-contenttype

Anmärkningar

The use of auxotrophic Saccharomyces cerevisiae strains for improved production of a heterologous protein was examined. Two different marker genes were investigated, encoding key enzymes in the metabolic pathways for amino acid (LEU2) and pyrimidine (URA3) biosynthesis, respectively. Expression plasmids, carrying the partly defective selection markers LEU2d and URA3d, were constructed. Two CEN.PK-derived strains were chosen and insulin analogue precursor was selected as a model protein. Different truncations of the LEU2 and URA3 promoters were used as the mean to titrate the plasmid copy number and thus the recombinant gene dosage in order to improve insulin productivity. Experiments were initially carried out in batch mode to examine the stability of yeast transformants and to select high yielding mutants. Next, chemostat cultivations were run at high cell density to address industrial applicability and long-term expression stability of the transformants. We found that the choice of auxotrophic marker is crucial for developing a yeast expression system with stable heterologous protein production. The incremental truncation of the URA3 promoter led to higher plasmid copy numbers and IAP yields, whereas the truncation of the LEU2 promoter caused low plasmid stability. We show that the modification of the level of the recombinant gene dosage by varying the degree of promoter truncation can be a strong tool for optimization of productivity. The application of the URA3d-based expression systems showed a high potential for industrial protein production and for further academic studies.

Ämnesord och genrebeteckningar

TEKNIK OCH TEKNOLOGIER Industriell bioteknik hsv//swe
ENGINEERING AND TECHNOLOGY Industrial Biotechnology hsv//eng
NATURVETENSKAP Biologi Mikrobiologi hsv//swe
NATURAL SCIENCES Biological Sciences Microbiology hsv//eng
Plasmid copy number
URA3d
High cell density cultivation
LEU2d
Human insulin
Promoter truncation

Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)

Norgaard, P.Novo Nordisk A/S,Novo Nordisk (författare)
Palmqvist, E. A.Novo Nordisk A/S,Novo Nordisk (författare)
Andersen, A. S.Novo Nordisk A/S,Novo Nordisk (författare)
Olsson, Lisbeth,1963Chalmers tekniska högskola,Chalmers University of Technology(Swepub:cth)lisbetho (författare)
Chalmers tekniska högskolaNovo Nordisk A/S (creator_code:org_t)

Sammanhörande titlar

Ingår i:Applied Microbiology and Biotechnology: Springer Science and Business Media LLC97:9, s. 3939-39481432-06140175-7598

Internetlänk

Hitta via bibliotek

Applied Microbiology and Biotechnology (Sök värdpublikationen i LIBRIS)

Till lärosätets databas

1 av 1
Föregående post
Nästa post
Till träfflistan

Hitta mer i SwePub

Av författaren/redakt...: Kazemi Seresht, ...; Norgaard, P.; Palmqvist, E. A.; Andersen, A. S.; Olsson, Lisbeth, ...

Om ämnet

TEKNIK OCH TEKNOLOGIER: TEKNIK OCH TEKNO ...; och Industriell biot ...

NATURVETENSKAP: NATURVETENSKAP; och Biologi; och Mikrobiologi

Artiklar i publikationen: Applied Microbio ...

Av lärosätet: Chalmers tekniska högskola

Sök utanför SwePub

Sök vidare i:: Google; Google Book Search; Google Scholar

Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.

LIBRIS.kb.se