SwePub
Sök i LIBRIS databas

  Utökad sökning

onr:"swepub:oai:lup.lub.lu.se:37cfb91f-de53-4667-87a4-e2da54506503"
 

Sökning: onr:"swepub:oai:lup.lub.lu.se:37cfb91f-de53-4667-87a4-e2da54506503" > Improved affinity c...

  • Steinhauer, CorneliaLund University,Lunds universitet,Institutionen för immunteknologi,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Department of Immunotechnology,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH (författare)

Improved affinity coupling for antibody microarrays: Engineering of double-(His)(6)-tagged single framework recombinant antibody fragments

  • Artikel/kapitelEngelska2006

Förlag, utgivningsår, omfång ...

  • Wiley,2006

Nummerbeteckningar

  • LIBRIS-ID:oai:lup.lub.lu.se:37cfb91f-de53-4667-87a4-e2da54506503
  • https://lup.lub.lu.se/record/395445URI
  • https://doi.org/10.1002/pmic.200600036DOI

Kompletterande språkuppgifter

  • Språk:engelska
  • Sammanfattning på:engelska

Ingår i deldatabas

Klassifikation

  • Ämneskategori:art swepub-publicationtype
  • Ämneskategori:ref swepub-contenttype

Anmärkningar

  • Antibody-based microarray is a novel technology with great promise in biomedicine that will provide unique means to perform global proteome analysis. In the process of designing the high-density antibody microarrays required, several critical key issues have been identified that remain to be resolved. In particular, there is a great need for specific and selective approaches enabling non-purified probes to be directly purified, orientated and coupled in a generic one-step procedure directly on the chip. In this study, we report on the successful design of affinity-tagged human recombinant single-chain fragment variable antibody fragments for improved affinity coupling in array applications. By replacing the standard single-histidine (His)(6)-tag with a consecutive double-(His)(6)-tag, the binding to Ni2+-nitrilotriacetic acid-coated substrates was significantly improved. Surface plasmon resonance analysis showed a significantly tighter binding with at least a threefold slower dissociation. The improved binding characteristics thus enabled non-purified probes even in the format of crude expression supernatants to be directly applied thereby eliminating the need for any time-consuming pre-purification step(s) prior to the immobilization. While the double-(HiS)(6)-tag probes were found to be expressed equally well as compared to the single-(His)(6)-tag probes, they displayed better long-term functional on-chip stability. Taken together, the results demonstrate the generic potential of double-(HiS)(6)-tag recombinant antibodies for the facile fabrication of high-density antibody microarrays.

Ämnesord och genrebeteckningar

Biuppslag (personer, institutioner, konferenser, titlar ...)

  • Wingren, ChristerLund University,Lunds universitet,Institutionen för immunteknologi,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Department of Immunotechnology,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH(Swepub:lu)immt-cwi (författare)
  • Khan, Farid (författare)
  • He, Mingyue (författare)
  • Taussig, Michael J. (författare)
  • Borrebaeck, CarlLund University,Lunds universitet,Institutionen för immunteknologi,Institutioner vid LTH,Lunds Tekniska Högskola,Department of Immunotechnology,Departments at LTH,Faculty of Engineering, LTH(Swepub:lu)immt-cbo (författare)
  • Institutionen för immunteknologiInstitutioner vid LTH (creator_code:org_t)

Sammanhörande titlar

  • Ingår i:Proteomics: Wiley6:15, s. 4227-42341615-98611615-9853

Internetlänk

Hitta via bibliotek

Till lärosätets databas

Sök utanför SwePub

Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.

 
pil uppåt Stäng

Kopiera och spara länken för att återkomma till aktuell vy