SwePub
Sök i LIBRIS databas

  Utökad sökning

WFRF:(Blomberg Björn)
 

Sökning: WFRF:(Blomberg Björn) > Multiplex and quant...

Multiplex and quantifiable detection of nucleic acid from pathogenic fungi using padlock probes, generic real time PCR and specific suspension array readout

Eriksson, Ronnie (författare)
Uppsala universitet,Klinisk virologi
Jobs, Magnus (författare)
Högskolan Dalarna,Uppsala universitet,Klinisk virologi,Medicinsk vetenskap
Ekstrand, Charlotta (författare)
Karolinska Institutet,Uppsala universitet,Klinisk virologi
visa fler...
Ullberg, Måns (författare)
Karolinska Institutet
Herrmann, Björn (författare)
Uppsala universitet,Klinisk bakteriologi
Landegren, Ulf (författare)
Uppsala universitet,Institutionen för genetik och patologi
Nilsson, Mats (författare)
Uppsala universitet,Institutionen för genetik och patologi
Blomberg, Jonas (författare)
Uppsala universitet,Klinisk virologi
visa färre...
 (creator_code:org_t)
Elsevier BV, 2009
2009
Engelska.
Ingår i: Journal of Microbiological Methods. - : Elsevier BV. - 0167-7012 .- 1872-8359. ; 78:2, s. 195-202
  • Tidskriftsartikel (refereegranskat)
Abstract Ämnesord
Stäng  
  • A new concept for multiplex detection and quantification of microbes is here demonstrated on a range of infectious fungal species. Padlock probe methodology in conjunction with qPCR and Luminex technology was used for simultaneous detection of ten fungal species in one single experiment. By combining the multiplexing properties of padlock probes and Luminex detection with the well established quantitative characteristics of qPCR, quantitative microbe detection was done in 10-plex mode. A padlock probe is an oligonucleotide that via a ligation reaction forms circular DNA when hybridizing to specific target DNA. The region of the padlock probe that does not participate in target DNA hybridization contains generic primer sequences for amplification and a tag sequence for Luminex detection. This was the fundament for well performing multiplexing. Circularized padlock probes were initially amplified by rolling circle amplification (RCA), followed by a SybrGreen real time PCR which allowed an additive quantitative assessment of target DNA in the sample. Detection and quantification of amplified padlock probes were then done on color coded Luminex microspheres carrying anti-tag sequences. A novel technique, using labeled oligonucleotides to prevent reannealing of amplimers by covering the flanks of the address sequence, improved the signal to noise ratio in the detection step considerably. The method correctly detected fungi in a variety of clinical samples and offered quantitative information on fungal nucleic acid.

Ämnesord

NATURVETENSKAP  -- Biologi -- Mikrobiologi (hsv//swe)
NATURAL SCIENCES  -- Biological Sciences -- Microbiology (hsv//eng)

Nyckelord

Multiplex detection
Pathogenic fungi
Padlock probe
Rolling circle amplification
Real time PCR
Nucleic acid hybridization
Suspension array
MEDICINE
MEDICIN
Multiplex detektion av patogena agens

Publikations- och innehållstyp

ref (ämneskategori)
art (ämneskategori)

Hitta via bibliotek

Till lärosätets databas

Kungliga biblioteket hanterar dina personuppgifter i enlighet med EU:s dataskyddsförordning (2018), GDPR. Läs mer om hur det funkar här.
Så här hanterar KB dina uppgifter vid användning av denna tjänst.

 
pil uppåt Stäng

Kopiera och spara länken för att återkomma till aktuell vy